4-Nitrofenil beta-D-galaktopiranozido CAS:200422-18-0

Efiko: ONPG estas substrato specife uzita por detekti la ĉeeston kaj agadon de la enzimo β-galaktosidase.Kiam β-galaktosidasa enzimo ĉeestas kaj aktiva, ĝi fendas ONPG en du produktojn: o-nitrofenolo kaj galaktozoderivaĵo.La liberigo de o-nitrofenolo rezultigas flavan kolorŝanĝon, kiu povas esti mezurita per spektrofotometro.

Apliko: ONPG havas plurajn aplikojn en molekula biologio kaj biokemia esplorado:

Determino de β-galaktosidase-agado: ONPG estas ofte uzita por mezuri kaj kvantigi la agadon de β-galaktosidase-enzimo.La indico de o-nitrofenola formado, kiu estas rekte proporcia al la enzimaktiveco, povas esti mezurita spektrofotometrie.

Genekspresio kaj reguligo: ONPG ofte estas utiligita en eksperimentoj ligitaj al genekspresio kaj reguligaj studoj.Ĝi estas ofte uzita en fuziaj proteinanalizoj, kiel ekzemple la ofte uzita lacZ-fuziosistemo, por studi la esprimon de genoj sub la kontrolo de specifaj reklamantoj.La beta-galaktosidasa agado mezurita uzante ONPG disponigas sciojn pri la nivelo de genekspresio.

Rastrumo por β-galaktosidase-agado: ONPG povas esti utiligita kiel kolorimetra ekzamena metodo en rekombina DNA-teknologio por identigi la ĉeeston kaj funkciecon de la LacZ-geno, kiu ĉifras β-galaktosidase.Ĉi tiu ekzamena metodo helpas identigi klonojn, kiuj enhavas la interesan genon.

Enzimaj kinetikstudoj: ONPG ankaŭ estas utila en studado de la kinetiko de β-galaktosidase-enzimo.Mezurante la indicon de enzim-substrata reago ĉe malsamaj substratkoncentriĝoj, estas eble determini kinetikajn parametrojn kiel ekzemple Michaelis-Menten-konstantoj (Km) kaj maksimumajn reagrapidecojn (Vmax).