Ĉirkaŭ ni estas multaj nekantitaj herooj, kiuj ŝajnas esti ordinaraj, sed fakte ili silente multe kontribuas al ni.Proteinazo K estas la "nekonata heroo" en la molekula diagnoza industrio, kvankam kompare kun la "granda kaj potenca" en la industrio, proteinazo K estas tiom modesta, ke ni delonge preteratentis ĝian gravecon.Kun la eksplodo de la nova krona epidemio, la postulo je proteinazo K altiĝis, kaj la provizo en- kaj eksterlande estas multe malantaŭ la konsumo, kaj ĉiuj subite rimarkis, ke proteinazo K estas tiel grava.
Kio estas la uzo de proteinazo K?
Proteinazo K estas serina proteazo kun proteoliza enzima agado kaj povas konservi agadon en larĝa gamo de medioj (pH (4-12,5), alta sala bufro, alta temperaturo de 70 °C, ktp.).Krome, la aktiveco de proteinazo K ne estas malhelpata de SDS, ureo, EDTA, guanidina klorhidrato, guanidina izotiocianato, ktp., kaj certa kvanto da lesivo ankaŭ povas plibonigi la aktivecon de proteinazo K. En kuracado (viruso kaj mikroba desinfekto). ), manĝaĵo (viando moliĝo), ledo (harmoligado), vinfarado (alkoholo klarigo), aminoacida preparado (degraditaj plumoj), nuklea acida eltiro, surloke hibridiĝo, ktp., proteinazo K Estas aplikoj.La plej ofte uzata aplikaĵo estas nuklea acida eltiro.
Proteinazo K povas enzimoligi ĉiajn proteinojn en la specimeno, inkluzive de tiuj histonoj, kiuj estas forte ligitaj al nukleaj acidoj, tiel ke la nukleaj acidoj povas esti liberigitaj el la specimeno kaj liberigitaj en la ekstrakto, faciligante la sekvan paŝon de eltiro kaj purigo.En la detekto de virusa nuklea acido, proteinazo K estas unu el la gravaj komponentoj en la virusprova solvaĵo.Proteinazo K povas fendi kaj malaktivigi la mantelo-proteinon de la viruso, kiu estas pli sekura dum la transporta kaj detekta stadio;krome, proteinase K ankaŭ povas degradi RNase malhelpas la degeneron de virusa RNA kaj faciligas nukleaacidan detekton.
La subita famo de proteinazo K
Ĉu en la kampo de scienca esplorado aŭ en la kampo de IVD, nuklea acida eltiro estas la plej baza eksperimento, do proteinazo K ĉiam estis tre grava ekzisto.Tamen, en la pasinteco, proteinazo K estis multe malpli konata ol ĝia rolo.Granda parto de tio estis ĉar la ofertado kaj postulrilato de proteinazo K estis tre stabila.Malmultaj homoj pensus, ke la provizo de proteinazo K estus problemo.
Kun la ekapero de la nova krona epidemio, la postulo pri nukleaacido-testado pliiĝis.Fine de junio 2020, Ĉinio kompletigis preskaŭ 90 milionojn da novaj kronaj testoj, kaj ĉi tiu nombro estas eĉ pli alarma tutmonde.En eksperimentoj pri ekstraktado de nukleaj acidoj, la laborkoncentriĝo de proteinazo K estas ĉirkaŭ 50-200 μg/mL.Ĝenerale, necesas proksimume 100 μg da proteinazo K por eltiri provaĵon de nuklea acido.En efektiva uzo, por pliigi la efikecon de nuklea acida eltiro, ofte Proteinase K estos uzata en pliigita kvanto.Detekto de nuklea acido de la nova koronavirus alportis grandan kvanton da postulo de proteinaza K.La origina provizo kaj postulekvilibro de proteinazo K estis rapide rompita, kaj proteinazo K iĝis grava epidemia preventa materialo dum la nokto.
Malfacilaĵoj en la produktado de proteinazo K
Kvankam kun la disvolviĝo de la epidemio, la grava valoro de proteinazo K estis taksita de homoj, estas embarase, ke pro la troa malalta klavo de proteinazo K, malmultaj enlandaj kompanioj estis implikitaj en la produktado de proteinazo K. Kiam homoj volas establi proteinazon K-produktadon Dum la produktada procezo, oni malkovris, ke proteinazo K estas ekstreme speciala proteino.Estas ekstreme defie vastigi la produktadkapaciton de proteinazo K en mallonga tempodaŭro.
La grandskala produktado de proteinazo K alfrontas la sekvajn malfacilaĵojn
1. Malalta esprimo
Proteinazo K povas nespecife degradi la plej multajn proteinojn kaj kaŭzi gravan toksecon al la esprimo gastiga ĉelo.Tial, la esprimnivelo de proteinazo K estas ĝenerale tre malalta.Rastrumo de esprimosistemoj kaj trostreĉoj kiuj altagrade esprimas proteinazon K ĝenerale postulas pli longan ciklon.
2. Restoj de pigmentoj kaj nukleaj acidoj
Grandskala fermentado enkondukas grandan kvanton de pigmento kaj gastigantaj nukleacidaj restaĵoj.Estas malfacile forigi ĉi tiujn malpuraĵojn per simpla puriga procezo, kaj kompleksa purigado pliigas la koston kaj reduktas la reakiron.
3. Malstabileco
Proteinazo K ne estas sufiĉe stabila, ĝi povas enzimoligi sin, kaj estas malfacile konservi ĝin stabile je 37 °C dum longa tempo sen protekta agento.
4. Facile precipitar
Kiam vi preparas la liofiligitan pulvoron de proteinazo K, por certigi, ke la solida enhavo de proteinazo K en la liofiligita pulvoro estas granda, necesas aldoni frostsekigitan protektan agenton je alta koncentriĝo, sed kiam la koncentriĝo de proteinazo K atingas 20mg/mL kaj pli, ĝi estas facila La agregado formas precipitaĵon, kiu alportas grandajn malfacilaĵojn al la frostigiĝado de proteinazo K kun alta solida enhavo.
5. Granda investo
Proteinazo K havas fortan proteazaktivecon kaj povas hidrolizi aliajn proteazojn en la laboratorio.Tial, proteinazo K postulas specialecajn produktadareojn, ekipaĵon, kaj personaron por esplorado kaj evoluo kaj produktado.
Proteinaza K-solvo de XD BIOCHEM
XD BIOCHEM havas maturan proteinan esprimon kaj purigan platformon, kaj havas riĉan sperton pri la esprimo kaj purigado de rekombinaj proteinoj kaj optimumigo de produktadaj procezoj.Per la rapida formado de esplora kaj evoluiga teamo, la grandskala produktada procezo de proteinazo K estis venkita.La monata produktado de frost-sekigita pulvoro estas pli ol 30 KG.La produkto havas stabilan agadon, altan enziman specifan agadon, kaj neniun gastigantajn citokromojn kaj nukleajn acidajn restaĵojn.Bonvenon kontakti XD BIOCHEM Akiru provpakaĵon (Retpoŝto:sales@xdbiochem.comTel: +86 513 81163739).
La teknikaj solvoj de XD BIOCHEM inkluzivas
Uzante multkopian plasmid-integriĝon, alt-esprimotrostreĉoj kun esprimnivelo de 8g/L estas elektitaj, kiu venkas la problemon de malalta esprimnivelo de proteinazo K.
Tra la establado de plurpaŝa purigadprocezo, la gastiga citokromo kaj nukleaacidaj restaĵoj de proteinazo K estis sukcese forigitaj sub la norma valoro.
Tra alt-trafia kribrado de protektaj bufroformuliĝoj, bufro kiu povas stabile stoki proteinazon K je 37 °C estis elektita.
Ekzamenaj bufroj venkas la problemon ke proteinazo K estas facile agregebla kaj precipitaĵo ĉe altaj koncentriĝoj, kaj amorigas la fundamenton por la alta solidenhavo de proteinazo K liostigi.
XD BIOCHEM proteinazo K specimeno
Testo de stabileco de XD BIOCHEM proteinaza K: ne estos signifa ŝanĝo en agado post 80 d ĉe ĉambra temperaturo
Testo de stabileco de XD BIOCHEM proteinase K: ne estos signifa ŝanĝo en agado post 80 d ĉe ĉambra temperaturo.
Komparo de la nukleacida ekstrakta efiko de XD BIOCHEM proteinazo K kaj konkurantaj produktoj.En la procezo de nukleacida ekstraktado, XD BIOCHEM kaj konkurenciva proteinazo K estas uzataj respektive.La ekstrakta efikeco de XD BIOCHEM proteinase K estas pli alta kaj la Ct-valoro de la celgeno estas pli malalta.
Afiŝtempo: Dec-31-2021