Fenilgalaktozido CAS: 2818-58-8

Efiko sur enzima aktiveco: Fenilgalaktozido estas ofte uzata por mezuri la aktivecon de la enzimo β-galaktozidazo. Kiam fenilgalaktozido estas hidrolizita per β-galaktozidazo, ĝi liberigas p-nitrofenolon. La amasiĝo de p-nitrofenolo povas esti kvante mezurita, provizante komprenojn pri la aktiveco de β-galaktozidazo. Ĉi tiu efiko estas utiligata en aplikoj kiel enzimaj analizoj kaj rastrumsistemoj.

Analizo de genekspresio: Fenilgalaktozido ofte estas uzata kiel substrato en molekulbiologiaj eksperimentoj por studi genekspresion. La lacZ-geno, kiu ĉifras β-galaktozidazon, estas ofte kunfandita kun reguligaj sekvencoj de aliaj interesaj genoj. La esprimo de la lacZ-geno kaj la hidrolizo de fenilgalaktozido per β-galaktozidazo povas indiki la esprimpadronon kaj nivelon de la studata cela geno.

Rastrumsistemoj: Fenilgalaktozido estas grava komponanto de rastrumsistemoj, kiuj utiligas β-galaktozidazan agadon. Unu vaste konata ekzemplo estas la blu-blanka rastrummetodo, kiu estas uzata por identigi rekombinitajn aŭ transformitajn ĉelojn en molekulbiologiaj eksperimentoj. Kolonioj, kiuj sukcese sorbigis la rekombinitan DNA-on aŭ spertis genetikan rekombinadon, esprimos β-galaktozidazon, kondukante al la hidrolizo de fenilgalaktozido kaj la formado de blua koloro.

Proteina purigo: En iuj kazoj, fenilgalaktozido povas esti uzata kiel ligando por afineca kromatografio por purigi proteinojn, kiuj specife ligiĝas al aŭ estas aktivigitaj per β-galaktozidazo. La interesa proteino povas havi afinecan etikedon aŭ fuzian etikedon enhavantan β-galaktozidazo-ligantan domajnon. Per pasado de la proteina miksaĵo tra kolono kun senmovigita fenilgalaktozido, la dezirata proteino povas esti selekteme retenita kaj poste eluita.